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QLISA
量子點(diǎn)熒光免疫吸附分析（Quantum dot-linked immunosorbent assay，QLISA）原理與酶聯(lián)免疫吸附分析（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）相似，是指利用抗體與相應(yīng)抗原的特異性結(jié)合反應(yīng)，對(duì)樣品進(jìn)行定性或定量檢測(cè)的分析方法。不同的是，ELISA使用酶聯(lián)標(biāo)記物催化顯色底物產(chǎn)生有色產(chǎn)物，利用顯色深淺進(jìn)行定量分析；而QLISA則采用量子點(diǎn)標(biāo)記物產(chǎn)生熒光信號(hào)，指示特定抗原或抗體是否存在，并利用熒光強(qiáng)弱進(jìn)行定量分析。
ELISA方法靈敏度高，可進(jìn)行定量檢測(cè)。但操作繁瑣，定量重復(fù)性較差，結(jié)果易受酶活性及底物穩(wěn)定性影響。量子點(diǎn)作為新型熒光納米材料運(yùn)用于QLISA，具有熒光效率高、穩(wěn)定性高、Stockes位移較大、發(fā)射光譜窄而對(duì)稱、單一波長(zhǎng)多色激發(fā)等諸多優(yōu)秀的熒光特性，可替代ELISA，實(shí)現(xiàn)高靈敏多指標(biāo)同時(shí)檢測(cè)，且無需顯色操作、方便快捷、重復(fù)性高，同時(shí)結(jié)果可在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)多次激發(fā)觀測(cè)保持穩(wěn)定。
與ELISA相似，按照實(shí)驗(yàn)方法分類，QLISA主要也可分為夾心法、間接法、以及競(jìng)爭(zhēng)法。
夾心法
夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原（具有多個(gè)不同的抗原表位），一般操作步驟為:
1. 將具有專一性抗體（通常為單克隆抗體）吸附固定于塑料孔板上，完成后洗去多余抗體，加入合適的封閉劑以封閉孔板表面空余位點(diǎn)。
2. 加入待檢樣本，若含有對(duì)應(yīng)抗原，則其會(huì)與塑料孔板上的抗體特異性結(jié)合。
3. 洗去多余樣品，加入另一種專一性抗體（一抗通常亦為單克隆抗體，與之前的專一性抗體合稱配對(duì)單抗），與待測(cè)抗原進(jìn)行結(jié)合。
4. 洗去多余未結(jié)合抗體，加入帶有量子點(diǎn)標(biāo)記二抗（一般為抗抗體），與一抗結(jié)合。
5. 洗去多余未結(jié)合二抗，按照量子點(diǎn)標(biāo)記二抗說明書以肉眼或儀器讀取熒光結(jié)果。
夾心法使用了兩種單克隆抗體對(duì)抗原不同表位進(jìn)行識(shí)別，因此特異性高，但待測(cè)抗原必須是多價(jià)抗原，并且有合適的配對(duì)單抗，以分別進(jìn)行夾心，一般不適用于半抗原或小分子抗原。
間接法
間接法常用于檢測(cè)抗體，一般操作步驟為：
1. 將已知之抗原吸附固定于塑料孔板上，完成后洗去多余抗原，加入合適的封閉劑以封閉孔板表面空余位點(diǎn)。
2. 加入待測(cè)樣本，樣品中若含有對(duì)應(yīng)抗體（一抗），則其會(huì)與塑料孔板上的抗原特異性結(jié)合。
3. 洗去多余樣品，加入帶有量子點(diǎn)標(biāo)記二抗（一般為抗抗體），與一抗結(jié)合。
4. 洗去多余未結(jié)合二抗，按照量子點(diǎn)標(biāo)記二抗說明書以肉眼或儀器讀取顯色結(jié)果。
競(jìng)爭(zhēng)法
競(jìng)爭(zhēng)法一般用于檢測(cè)小分子抗原，當(dāng)需要檢測(cè)無法獲得配對(duì)單抗的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體時(shí)，一般也會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法。一般操作步驟為：
1. 將具有專一性抗體吸附固定于塑料孔板上，完成后洗去多余抗體，加入合適的封閉劑以封閉孔板表面空余位點(diǎn)。
2. 加入待測(cè)樣品，樣品中的待測(cè)抗原與塑料孔板上的抗體特異性結(jié)合。
3. 加入帶有量子點(diǎn)標(biāo)記的抗原，與塑料孔板上的未結(jié)合抗原的多余抗體進(jìn)行專一性結(jié)合，由于塑料孔板上的抗體數(shù)量有限，因此樣品中抗原的量越多，則帶有量子點(diǎn)標(biāo)記抗原可結(jié)合的剩余抗體就越少，兩者相互競(jìng)爭(zhēng)。
4. 洗去樣品與量子點(diǎn)標(biāo)記抗原，當(dāng)樣品中抗原越多，代表塑料孔板內(nèi)留下的量子點(diǎn)標(biāo)記抗原越少，熒光信號(hào)越弱。0
QLISA實(shí)例：
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