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熒光顯微成像
顯微鏡是生命科學研究領(lǐng)域中一個重要的工具，而放大倍率和分辨率是顯微鏡的重要指標。一般來說，放大倍率越大，分辨率會更高，但普通的亮場顯微鏡由于樣品中不同組分之間的差異較小，因此大放大倍率下，分辨率不會明顯提高，必須通過特定的染色方法進行觀察（圖1）。通過合適的激發(fā)光源和濾光系統(tǒng)配合，熒光顯微鏡可以達到光學顯微鏡的分辨率極限。
圖1，亮場顯微鏡（左）與熒光顯微鏡對相同樣本的觀察結(jié)果比較。
量子點標記探針
通過使用熒光探針，包括免疫熒光探針如量子點-抗體偶聯(lián)產(chǎn)物或核酸熒光探針如量子點-寡聚脫氧核酸偶聯(lián)產(chǎn)物，基于抗原-抗體特異性結(jié)合或核酸序列互補原理，標記細胞表面或內(nèi)部的目標物質(zhì)。然后使用熒光顯微鏡，使用特定波長激發(fā)熒光物質(zhì)顯色，以獲得目標物質(zhì)在細胞微觀環(huán)境中的分布情況。傳統(tǒng)的熒光染料，由于激發(fā)波長不同以及發(fā)射波半峰寬較大易相互干擾，因此一般需要一組濾鏡濾色拍攝多張圖片再進行疊加，同時檢測的目標物質(zhì)數(shù)量也受到局限。同時一般的熒光染料，其光穩(wěn)定性差，易產(chǎn)生光漂白，進行活細胞染色時長時間或多次動態(tài)觀察比較困難。而量子點由于優(yōu)異的多色激發(fā)和耐光漂白特性，應用不同色彩的量子點可用一個波長激發(fā)出多種不同波長且峰寬窄而對稱的熒光，不僅簡化了熒光顯微鏡的設(shè)計制造成本，同時豐富了多元分析體系，并且長時間激發(fā)熒光衰減很小，動態(tài)觀察的可比性很強。
量子點顯微成像實例：
圖2，羊抗鼠-QD605（左圖，Cat: Q2104/Q2104a）和親和素-QD605（右圖，Cat: 1104/Q1104a）通過抗微管蛋白一抗對細胞骨架的免疫熒光染色顯微照片。
圖3，MC3T3-E1細胞p-Smad1/5（1:40）蛋白（紅色，羊抗鼠QD605，Cat: Q2104/Q2104a）和核（藍色，DAPI）的免疫熒光染色顯微照片及疊加合成
圖4，MDA-MB-231細胞分別轉(zhuǎn)染5nm QD605-let7a（核酸量子點探針，定制產(chǎn)品，上排圖示）和100nm Cy3標記let7a（下排圖示）的活細胞熒光染色照片。
相關(guān)產(chǎn)品：
